IL-12介紹

1989年，白細胞介素-12（IL-12）從EB病毒轉化的B淋巴細胞上清液中被鑒定出來，當加入人外周血淋巴細胞時，因其能誘導干擾素（IFN）-γ和自然殺傷（NK）介導的細胞毒性而被命名為“自然殺傷刺激因子"。這種促炎癥的異源二聚體細胞因子由共價連接的p40和p35亞基組成，是IL-12細胞因子家族中的一員，該家族還包括IL-23、IL-27、IL-35和IL-39等因子。IL-12和IL-23都是復合型細胞因子，有一個共同的IL-12 p40亞基并共用IL-12Rβ1受體，而其因子特異性則主要由IL-12 p35亞基以及IL-23p19亞基分別與IL-12Rβ2受體以及IL-23R受體結合而得到區(qū)分。p35和p40基因都需要在同一個細胞內(nèi)表達并形成具有活性的異源二聚體并隨后介導IL-12通路信號的產(chǎn)生。

吞噬細胞和樹突狀細胞受到細菌和微生物刺激后會分泌產(chǎn)生IL-12，伴隨抗原呈遞，IL-12誘導CD4+T細胞分化為產(chǎn)生IFN-γ的輔助性T細胞1（Th1）以及誘導淋巴因子激活的殺傷細胞和NK細胞。這些Th1細胞對細胞內(nèi)病原體微生物（如嗜肺軍團菌、結核分枝桿菌、單核細胞增生李斯特菌和沙門氏菌屬等）產(chǎn)生反應和促進滯發(fā)性超敏反應和巨噬細胞活化。

NK、B和T細胞是主要的表達IL-12受體的細胞，IL-12介導的信號通過將酪氨酸激酶TYK2和JAK2分別招募到IL-12Rβ1以及IL-12Rβ2來啟動信號傳遞，隨后這些激酶會進一步磷酸化并激活下游的轉錄因子STAT4， 隨后STAT4復合物轉移到細胞核，與Jun癌基因（c-Jun）一起，與IFN-γ啟動子結合，導致IFN-γ轉錄和Th1分化。此外，IL-12相關的IFN-γ產(chǎn)生會進一步誘導趨化因子CXCL10的產(chǎn)生，進而抗血管生成。

IL-12與免疫類疾病的相關性及藥物開發(fā)

在體內(nèi)中，IL-12和IL-23由組織中的樹突狀細胞和巨噬細胞等“預警細胞"生成。在IL-12和IL-27的共同作用下CD4+ 輔助T細胞（Th）會分化為表達干擾素γ（IFNγ）的Th1細胞。而IL-23會與其它細胞因子共同作用，促使CD4+ Th細胞分化為Th17細胞，同時刺激Th17細胞分泌IL-17家族細胞因子，這些因子具有促炎癥的作用。

急性炎癥反應是身體對抗外來病原體入侵所產(chǎn)生的反應，然而當體內(nèi)炎癥相關細胞因子的水平失衡時，會引發(fā)炎癥持續(xù)發(fā)生，導致風濕性關節(jié)炎、炎癥性腸?。↖BD，通常包括克羅恩病和潰瘍性腸炎）、脊柱關節(jié)炎（SpA）和銀屑病等慢性免疫類疾病。由于IL-12、IL-23/IL-17信號通路在釋放促炎癥細胞因子方面的重要作用，這一信號通路也成為開發(fā)治療慢性炎癥疾病的熱門靶標，催生了多款重磅藥物和在研療法。

由強生開發(fā)的Ustekinumab是一款針對IL-12和IL-23的抗體拮抗劑，它可以特異性的結合白細胞介素IL-12和IL-23的p40蛋白亞單位，通過同時抑制IL-12和IL-23相關信號通路來達到治療慢性炎癥相關的免疫類疾病。該藥自上市以來，已獲批中重度斑塊狀銀屑病、活動性銀屑病關節(jié)炎、中重度活動性克羅恩病以及中重度活動性潰瘍性結腸炎等多個相關適應癥。在國內(nèi)，康方生物自主開發(fā)的抗IL-12/IL-23單克隆抗體注射液AK101 也屬于同類產(chǎn)品，該藥物目前處于臨床實驗階段，開展了針對中重度斑塊狀銀屑病、中重度潰瘍性結腸炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡適應癥等多個臨床研究。

IL-12與腫瘤免疫的相關性及藥物開發(fā)

多項研究表明，IL-12可以通過多種免疫調(diào)節(jié)機制發(fā)揮抗腫瘤的作用，其作用機制主要有：

1）通過調(diào)節(jié)T細胞介導細胞免疫發(fā)揮抗腫瘤作用；

2）通過誘生IFN-γ介導抗腫瘤效應；

3）通過抑制血管生成發(fā)揮抗腫瘤作用。已有的數(shù)據(jù)表明修飾過的IL-12或人工合成的IL-12激動劑與PD-1&PD-L1, CTLA4等免疫檢查點抑制劑聯(lián)用可產(chǎn)生協(xié)同效應，增強藥物的抗腫瘤作用。以IL-12為靶點，開發(fā)腫瘤免疫相關療法的多項臨床研究也正在進行中。（如下表所示）

針對IL-12藥物的研發(fā)，科佰生物開發(fā)了相關細胞篩選模型，可用于細胞水平篩選IL-12激動劑或拮抗劑活性。

部分產(chǎn)品數(shù)據(jù)

IL12 Effector Reporter cell CBP74134

Figure 1. Dose Response of Recombinant Human IL12 in Human IL12 Effector Reporter Cells (C2).

Figure 2. Inhibition of IL12-induced Reporter Activity by IL-12/IL -23 p40 Neutralizing Antibody in IL12 Effector Reporter Cells (Clone2).