進(jìn)行細(xì)胞系STR鑒定是很重要的。很多生物醫(yī)藥的研究都采用培養(yǎng)細(xì)胞來進(jìn)行，這些細(xì)胞可能是受贈(zèng)于其它研究人員,也可能是從細(xì)胞庫(如美國(guó)?ATCC,American?Type?Culture?Collection)得來。據(jù)估計(jì)，15-20%的實(shí)驗(yàn)室，實(shí)驗(yàn)中所使用的細(xì)胞已經(jīng)不是原來的細(xì)胞系，或者與其它細(xì)胞系發(fā)生了交叉污染。顯然，細(xì)胞系遭到污染、特征鑒別錯(cuò)誤，將會(huì)極大的威脅著基于這些細(xì)胞而發(fā)表的論文質(zhì)量和研究發(fā)現(xiàn)的正確性。為此，很多細(xì)胞庫現(xiàn)在都要對(duì)提交來的細(xì)胞系進(jìn)行鑒定，并對(duì)細(xì)胞系之間的交叉污染進(jìn)行監(jiān)測(cè)。

　　現(xiàn)在很多機(jī)構(gòu)都已經(jīng)認(rèn)識(shí)到這個(gè)的重要性，ATCC和FDA，這些機(jī)構(gòu)要求對(duì)用于制藥領(lǐng)域的實(shí)驗(yàn)中所使用的材料?—?諸如細(xì)胞系?—?應(yīng)該進(jìn)行“身份鑒定”和純度測(cè)試。很多雜志也要求使用細(xì)胞系的文章提供STR指紋圖譜數(shù)據(jù)。

　　FDA建議研究人員在培養(yǎng)細(xì)胞的較早階段(細(xì)胞培養(yǎng)第一周)來鑒定細(xì)胞系的身份。細(xì)胞在被凍存前應(yīng)再一次進(jìn)行鑒定；對(duì)于活躍生長(zhǎng)的細(xì)胞，每?jī)蓚€(gè)月應(yīng)鑒定一次；文獻(xiàn)發(fā)表前也應(yīng)對(duì)細(xì)胞系身份進(jìn)行鑒定。

　　細(xì)胞如何運(yùn)輸？收到細(xì)胞后如何處理？

　　從美國(guó)運(yùn)輸過來的原裝 ATCC 細(xì)胞都是冰凍形式，采用干冰運(yùn)輸?shù)姆绞健Ｔ谑盏絻龃婕?xì)胞后，很重要的一點(diǎn)是迅速復(fù)蘇。

　　如果做不到立即復(fù)蘇，需將細(xì)胞存儲(chǔ)在液氮中。請(qǐng)不要將細(xì)胞存放在 -80 ℃ 冰箱，這會(huì)使細(xì)胞存活率迅速下降。

　　使用什么培養(yǎng)基？

　　復(fù)蘇細(xì)胞時(shí)需要準(zhǔn)備合適的培養(yǎng)基，血清和細(xì)胞生長(zhǎng)所需的添加劑。雖然大多數(shù)細(xì)胞系可以在不止一種培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，但是當(dāng)培養(yǎng)基改變時(shí)，細(xì)胞的性質(zhì)也會(huì)變化。

　　另外，有的培養(yǎng)基如 DMEM，各廠商提供產(chǎn)品雖然名稱相同，但成分也會(huì)有差異。為了保證細(xì)胞最大的復(fù)蘇率和維持細(xì)胞特性，建議購買細(xì)胞的時(shí)候，同時(shí)購買 ATCC 的培養(yǎng)基（見產(chǎn)品信息說明書和 ATCC 網(wǎng)站）。

　　收到細(xì)胞后為什么沒有說明書？

　　為了響應(yīng)環(huán)保號(hào)召，以及保證信息的快速更新。ATCC 細(xì)胞株寄送時(shí)沒有隨貨附帶紙質(zhì)版說明書。

　　ATCC細(xì)胞系說明書有關(guān)于細(xì)胞復(fù)蘇和傳代的詳細(xì)步驟。除說明書外，還有另外一份重要文件——COA（Certificate of Analysis）。COA 中包含具體批次信息，如每管細(xì)胞的數(shù)量，建議復(fù)蘇使用的培養(yǎng)基用量，已知細(xì)胞的傳代代次等重要信息。

>> 返回首頁